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N-VGCC Ab RIA

中文名稱 : N型電壓門控鈣通道自身抗體RIA檢測試劑盒
生產(chǎn)廠家 : RSR Limited
貨號 : N-VGC/25
規(guī)格 : 25T
適用病癥 : Lambert-Eaton肌無力綜合征
產(chǎn)品詳情

1.預(yù)期用途:

RSR 公司的N 型電壓門控鈣通道(N-VGCC)自身抗體放射免疫法(N-VGCC Ab RIA)試劑盒專用于定量檢測人血清中NVGCC 自身抗體(N-VGCCAb),僅供專業(yè)技術(shù)人員操作使用。僅供科研使用。


2.檢測意義:

N-VGCC 反應(yīng)的血清自身抗體最初在與Lambert-Eaton肌無力綜合征(LEMS)特異性相關(guān)的神經(jīng)肌肉接頭功能障礙中被報道。隨后,在中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,包括小腦變性和副腫瘤性自身免疫,特別是與小細(xì)胞肺癌(SCLC)相關(guān)的疾病中檢測到N-VGCC 抗體。功能性N-VGCC由一個成孔的α1 亞基和輔助亞基βγ,α2/δ組成,廣泛表達于中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)。N-VGCC抗體主要與α1亞基結(jié)合。該試劑盒使用簡單,為NVGCCAb 提供了一種特異而靈敏的檢測方法,是對RiaRSRTMVGCCAb RIA 試劑盒的補充,用于檢測P/Q VGCC 自身抗體。


3.試劑盒特性:

臨床特異性:用本試劑盒對59名健康志愿者血清進行檢測,5898.3%)均診斷為VGCC抗體陰性。

臨床靈敏性:用本試劑盒對20例血清呈P/Q-VGCC抗體陽性的患者進行檢測,6(30%)均被診斷為N-VGCC抗體陽性。

臨界值:陰性≤ 110 pmol/L; 陽性 >110 pmol/L


4.樣本要求:

15μL 血清/人份(1:10稀釋后每管為50 μL,避免使用脂血、溶血及血漿樣本。


5.組分性狀:

        25孔板,液體和凍干粉。


6.檢測原理:

RSR VGCC自身抗體放免法試劑盒采用放射免疫沉淀法原理,將從兔小腦提取的P型VGCC蛋白復(fù)合物,并經(jīng)過表面活性劑增溶及125I -ω-芋螺毒素MVIIC標(biāo)記,形成125I-VGCC(放射標(biāo)記抗原)?;颊哐逯蠽GCC 自身抗體與檢測抗原相結(jié)合后,同抗人免疫球蛋白G抗體形成免疫沉淀。免疫沉淀物的放射量與血清樣本中抗體水平成正比,即自身抗體的濃度越高,免疫沉淀物的放射性就越強。


7.     實驗步驟:

使用前所有試劑組分(除緩沖液外)需室溫放置(20-25 ℃)至少 30 分鐘。

加樣:

50 μL陰性質(zhì)控品(B)(直接使用,不用稀釋)、陽性質(zhì)控品(C 1-2) (直接使用,不用稀釋)和稀釋的患者血清(用緩沖液1: 10稀釋)

加樣:

50 μL 125I標(biāo)記的N-VGCC(A) (新鮮復(fù)溶)加入每個管子和兩個額外的空管中用于總計數(shù)。

試管:

蓋好試管,使用旋渦混合器輕輕混勻。

孵育:

2-8 ℃下,16-20 小時

加樣:

每管(不包括兩個總計數(shù)管)加入50 μL抗人IgG(D)。

試管:

蓋好試管,使用旋渦混合器輕輕混勻。

孵育:

2-8 ℃下,1.5 小時

加樣:

每管(不包括兩個總計數(shù)管)加入1 mL冷的緩沖液(E)

試管:

使用旋渦混合器輕輕混勻

試管:

4℃ 1500 g 離心 20 分鐘

試管:

棄去上清液

加樣:

每管(不包括兩個總計數(shù)管)加入1 mL冷的緩沖液(E)。

試管:

旋渦混合器重懸沉淀

試管:

4 ℃ 1500 g 離心 20 分鐘

試管:

棄去上清液

使用γ射線計數(shù)儀對每管計數(shù) 1分鐘


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